| Resumé |
L'érythropoïèse est le processus de formation de globule rouge mature qui se déroule dans la moelle osseuse. C'est un processus long qui se caractérise par un engagement par division cellulaire successive vers la lignée rouge et un grand nombre de changement cellulaire. Les érythroblastes, au fur et à mesure de la différentiation érythroïde vont perdre progressivement leur organelle, notamment leurs mitochondries et leur noyau pour devenir des globules rouge mature. Un grand nombre de protéines sont impliquer dans la maturation des érythroblastes. Notre équipe a publié des résultats montrant qu'une répression transcriptionnelle de TSPO1 entraîne un défaut d'énucléation et un retard dans l'élimination des mitochondries dans les cellules de sang de cordon. TSPO1 est une protéine présente à la membrane externe de la mitochondrie. En fonction du type cellulaire, TSPO1 peut remplir diverses fonctions, telles que le transport de la protoporphyrine IX (PPIX) ou la translocation du cholestérol. TSPO2 est un isoforme de TSPO qui est spécifique à la lignée érythroïde. Une perte de fonction de TSPO2 induit un changement de localisation du cholestérol et un défaut d'énucléation. La problématique centrale de ce travail de thèse a donc été de mieux comprendre la modulation de la fonction de TSPO ses effets sur l'érythropoïèse terminale humaine, avec une attention particulière sur le cholestérol et son impacte sur l'énucléation. Pour cela nous avons moduler la fonction de TSPO par un ligand : NCS1026 qui est connu pour moduler l'import de cholestérol dans les globules rouge mature et dans les cellules de neuroblastomes, impactant à la fois TSPO1 et TSPO2. Le ligand NCS1026 augmente l'énucléation, sans impacter la prolifération cellulaire ni la cinétique de différentiation. Ce phénotype s'accompagne d'une rétention mitochondriale et d'accumulation de vésicules au 14ème jour de différentiation. Le traitement au NCS1026 induit également un changement dans la réparation intracellulaire du cholestérol où il diminue de façon exacerbé le contenu en cholestérol (sous forme libre et de stockage) au cours de la différentiation érythroïde. Ce changement de répartition intracellulaire n'est pas dû à un changement dans l'import de cholestérol. Ce changement de niveau de cholestérol dans les cellules traitées avec NCS1026 est également visible dans les régions enrichies en cholestérol. En effet les cellules traitées présentent un plus grand nombre de point de contact entre les mitochondries et le réticulum endoplasmique (MAM). |