Virus Oropouche, Interaction virus-cellule hôte, CRISPR-Cas9, Crible génétique, Mesoderm development LRP chaperone, Glycoprotéines d'enveloppes, Protéine chaperonne

Le virus Oropouche (OROV) est un virus à ARN tri-segmenté simple brin de polarité négative du genre orthobunyavirus au sein de la famille des Peribunyaviridae. OROV est responsable de l'une des arboviroses les plus présentes dans la région amazonienne. La pathogenèse associée à OROV se traduit principalement par un syndrome fébrile aigu similaire à ceux d'autres arboviroses. Cependant des formes sévères de l'infection ont été rapportées, telles que des atteintes neurologiques (méningites, méningoencéphalites), des risques d'infections foetales par transmission verticale (mortinatalité, anomalie congénitale, fausse couche). Dans des cas très rare l'infection peut conduire au décès des patients. OROV est transmis principalement par un vecteur arthropode hématophage, Culicoides paraensis. Sa présence sur la majorité du continent américain fait craindre le risque d'émergence de ce virus dans de nouveaux territoires au sein de populations immunologiquement naïves. Bien que ce virus émergent représente un problème de santé publique, la biologie de ce virus reste mal connue. Il est donc urgent d'acquérir de nouvelles connaissances sur la biologie et la physiopathologie de OROV pour répondre à de futures épidémies. L'objectif principal de cette thèse a été d'identifier des facteurs proviraux impliqués dans l'infection. En réalisant un crible génétique à l'échelle du génome par une approche CRISPR-Cas9, nous avons identifié MESD comme un candidat majeur de l'infection par OROV. C'est une protéine chaperonne résidente du réticulum endoplasmique spécialisée dans le repliement d'une structure beta-propeller/domaine EGF majoritairement présente au sein de la famille des récepteurs LDLR. Des approches de validation fonctionnelle nous ont permis de confirmer son rôle proviral dans différentes lignées cellulaires. En testant la susceptibilité des cellules déplétées pour MESD à l'infection par d'autres arbovirus, nous avons démontré que son activité provirale est spécifique du virus Oropouche. Par différentes approches nous avons pu montrer que la contribution principale de MESD est de réguler une étape tardive de l'infection virale, avec un rôle minoritaire sur l'entrée des particules virales. Par des études de structures/fonctions, nous avons mis en évidence que son rôle canonique dans le repliement et l'expression des LRPs en surface n'est pas directement impliqué dans son rôle proviral, mais repose sur le domaine hydrophobe et conservé au sein de la protéine MESD qui est impliqué dans les interactions protéine-protéine. De manière importante, j'ai pu aussi établir que la protéine MESD interagit avec les glycoprotéines d'enveloppes virales Gn/Gc. En me basant sur l'ensemble des résultats obtenus durant ma thèse, j'ai pu établir un modèle suggérant que le protéine MESD contribuerait à l'assemblage et/ou la maturation des particules virales. Cependant, des études supplémentaires devront être réalisées afin de caractériser plus précisément le rôle proviral de MESD lors du cycle infectieux et d'élucider l'impact de l'interaction MESD-Gn/Gc sur l'infection. Cette thèse contribue à approfondir nos connaissances sur les interactions moléculaires qu'établit OROV lors de l'infection de la cellule hôte, permettant une meilleure compréhension de son cycle viral, et met en avant le potentiel intérêt de cibler l'interaction entre MESD et les glycoprotéines d'enveloppe pour une intervention thérapeutique.