Leucémie aiguë myéloïde, AMPK, Mort cellulaire immunogène

Introduction. Les leucémies aiguës myéloïdes (LAM) sont des hémopathies malignes résultant de la prolifération d'un progéniteur myéloïde immature. Les traitements actuels reposent sur la chimiothérapie intensive et l'allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) avec un taux de guérison inférieur à 30%. L'efficacité de l'allogreffe de CSH repose sur sa capacité d'élimination des cellules leucémiques par le système immunitaire du donneur. Toutefois, en dehors de ce contexte, le résultat des immunothérapies, telles que les inhibiteurs de checkpoint immunitaires, sont décevants. Nous avons montré les effets anti-leucémiques de l'activation d'AMP activated protein kinase (AMPK) - principal régulateur du niveau énergétique cellulaire - par le composé GSK621. Cet effet implique l'autophagie et la phosphorylation d'eiF2a, éléments clés de la mort cellulaire immunogène. Notre projet vise à évaluer si l'activation d'AMPK augmente l'adjuvanticité de la mort cellulaire tumorale via l'émission de signaux danger dans les LAM. Méthodes. Afin d'évaluer si l'activation d'AMPK majore l'immunogénicité de la mort cellulaire dans les LAM, nous avons étudié : 1. L'induction in vitro de l'exposition membranaire de la calréticuline (CRT), le principal médiateur de la mort cellulaire immunogène, dans des lignées cellulaires humine et murines de LAM ainsi que dans des échantillons primaires de patients atteints de LAM. 2. La capacité de cellules leucémiques à activer les cellules dendritiques dans des expériences de co-culture in vitro. 3. L'induction d'une réponse immunitaire in vivo chez des souris immunocompétentes via un test de vaccination dans lequel des cellules tumorales traitées préalablement par le composé GSK sont injectées en sous-cutané, suivi par l'injection de cellules tumorales intactes à un autre site. Nous avons mesuré la croissance tumorale au site du challenge, la survie globale, ainsi que la production d'IFNγ par les splénocytes ex vivo. Résultats. Nous avons mis en évidence que l'activation d'AMPK par le composé GSK 621, un activateur spécifique d'AMPK, induisait l'exposition préapoptotique de la CRT et que cet effet nécessitait l'expression d'AMPK. Dans les expériences de co-cultures, nous avons observé que des cellules tumorales prétraitées avec le composé GSK621 - mais pas celles tuées de manière aspécifique (cycles de congélation-décongélation) - étaient capables d'activer des cellules dendritiques dérivées de souris C57BL/6. Enfin nous avons observé un effet vaccinal in vivo dans le modèle de leucémie murine C1498, ainsi que dans des leucémies induites par l'oncogène MLL-AF9, dans lequel l'effet vaccinal des cellules prétraitées par le composé GSK621 était associé à une amélioration de la survie globale. D'autres expériences sont en cours afin de tester la spécificité de la réponse immune induite par l'activation d'AMPK dans ces modèles. Conclusions. Notre travail suggère le potentiel de l'activation de l'AMPK pour améliorer l'immunogénicité des cellules de LAM in vitro et in vivo, ce qui pourrait représenter une nouvelle façon de potentialiser l'activité anti-leucémique de l'immunothérapie dans les LAM.