TGF-β, Syndrome de Loeys-Dietz, Importine 8, Cellules pTreg, Intégrine alpha-V, Cellules B EF, Dérégulation immunitaire, Inflammation intestinale, Allergie

Un signalement aberrant du TGF-β sous-tend la pathogenèse de plusieurs maladies mendéliennes associant anomalies du développement, avec ou sans dérégulation immunitaire, notamment le syndrome de Loeys-Dietz (LDS), causé par des variants à perte de fonction dans TGFBR1/2. Notre laboratoire a récemment identifié la déficience en IPO8 comme cause d'un syndrome du tissu conjonctif associant anomalies du développement et dérégulation immunitaire. IPO8 code pour l'importine 8, membre de la famille des β-caryophérines impliqué dans le transport cytoplasme- noyau de diverses protéines cargos, notamment les SMAD, facteurs de transcription en aval de la voie TGF-β. Un modèle ipo8 knock-out (KO) chez le poisson-zèbre a montré des défauts précoces de la polarisation dorso-ventrale, caractéristiques d'une altération TGF-β/BMP, ainsi que des anomalies squelettiques et cardiovasculaires, principales manifestations observées dans notre cohorte de patients déficients en IPO8. Mon projet de thèse a visé à caractériser les phénotypes immunitaires liés à IPO8 et à explorer son rôle dans l'homéostasie intestinale. En élargissant la cohorte à 16 individus, nous avons constaté que la majorité des patients IPO8 présentait une maladie atopique et une atteinte gastro-intestinale, indiquant que les réponses immunitaires de type 2 et l'inflammation muqueuse sont des caractéristiques récurrentes du syndrome. L'analyse par scRNA-seq des cellules mononucléées du sang périphérique a révélé une diminution de l'expression des gènes répondant au TGF-β dans plusieurs sous-populations immunitaires, notamment les lymphocytes T et les monocytes, associée à un profil transcriptionnel pro- inflammatoire. Les lymphocytes T des patients présentaient une translocation nucléaire défectueuse de pSMAD2/3 et une induction altérée des gènes cibles du TGF-β, révélant un défaut intrinsèque de signalisation. Dans un modèle murin Ipo8 KO, la perte d'IPO8 perturbait l'homéostasie immunitaire de la lamina propria de l'intestin, orientant les réponses T vers des phénotypes effecteurs au détriment des régulateurs. Cela se traduisait par une augmentation des lymphocytes TCRβ+ proliférants et une réduction des T régulatrices double-positives RORγt+FOXP3+ (DP Treg). Ces altérations, absentes dans le côlon au repos, devenaient marquées après lésion au DSS, les souris Ipo8 KO échouant à étendre la population de DP Tregs coliques et développant une activation T exacerbée et une splénomégalie, suggérant que les changements de l'environnement intestinal peuvent déclencher une pathologie immunitaire en l'absence d'IPO8. In vitro, les lymphocytes T CD4+ naïfs déficients en Ipo8 montraient une différenciation altérée en DP Tregs sous stimulation par TGF-β1, malgré une prolifération accrue. En parallèle, j'ai caractérisé une nouvelle signalopathie TGF-β due à des variants dans l'intégrine alpha-V (ITGAV) chez un enfant présentant anomalies du développement, infections récurrentes, dermatite atopique, éosinophilie, colite éosinophilique et IgE élevées. ITGAV joue un rôle clé dans l'activation du TGF-β latent. La déficience en ITGAV induisait un fort biais immunitaire de type 2, marqué par une diminution des lymphocytes B totaux, une déplétion des B naïfs et une expansion des B mémoires. La perte d'ITGAV entraînait aussi une expansion rapide des réponses extra- folliculaires (EF) au détriment des réponses de centre germinatif (GC), associée à une hyperactivation de NF-κB et à l'accumulation d'un sous-ensemble atypique de lymphocytes B EF IgE+/IgG+ CD23+ CD11c+, représentant une population mémoire allergique potentiellement longue durée et hautement réactive. En conclusion, ma thèse identifie : -1 IPO8 comme modulateur tissulaire clé de la signalisation TGF-β, essentiel à la différenciation des Tregs muqueux et à l'homéostasie intestinale ; -2 une nouvelle signalopathie TGF-β, révélant que la perte d'ITGAV dans les lymphocytes